自動(dòng)過柱機(jī)作為化學(xué)實(shí)驗(yàn)中用于混合物分離純化的自動(dòng)化設(shè)備，能精準(zhǔn)控制洗脫過程，大幅提高分離效率和純度。掌握其規(guī)范操作流程，是確保實(shí)驗(yàn)成功的關(guān)鍵，以下詳細(xì)介紹。?

　　一、操作前的準(zhǔn)備工作?

　　首先要檢查過柱機(jī)的整體狀態(tài)。查看設(shè)備外觀是否完好，各連接管路有無破損、堵塞或松動(dòng)，確保輸液泵、檢測(cè)器、收集器等核心部件正常運(yùn)行。接通電源，打開設(shè)備總開關(guān)，啟動(dòng)控制系統(tǒng)，觀察各模塊是否正常響應(yīng)，顯示屏是否清晰顯示參數(shù)設(shè)置界面。?

　　其次是色譜柱的準(zhǔn)備。根據(jù)待分離樣品的性質(zhì)選擇合適規(guī)格的色譜柱，如硅膠柱、C18 柱等，并檢查色譜柱是否完好，柱床是否平整。若為新柱，需按照說明書進(jìn)行活化處理；若為舊柱，需確認(rèn)其性能是否滿足實(shí)驗(yàn)要求，必要時(shí)進(jìn)行沖洗再生。將色譜柱固定在設(shè)備的柱架上，注意柱的方向，確保流動(dòng)相入口和出口連接正確。?

　　然后進(jìn)行流動(dòng)相的配制與處理。根據(jù)分離方案準(zhǔn)確配制所需的洗脫劑，混合均勻后進(jìn)行過濾和脫氣處理，去除其中的顆粒雜質(zhì)和氣泡，避免堵塞色譜柱或影響檢測(cè)信號(hào)。將處理好的流動(dòng)相分別裝入對(duì)應(yīng)的溶劑瓶中，貼上標(biāo)簽注明名稱和濃度，并將溶劑瓶放置在設(shè)備的指定位置，連接好輸液管路，確保管路浸沒在流動(dòng)相中。?

　　最后是樣品的準(zhǔn)備。將待分離樣品溶解在合適的溶劑中，配制成一定濃度的樣品溶液，經(jīng)濾膜過濾后裝入樣品瓶，避免樣品中的不溶物污染色譜柱。同時(shí)，根據(jù)樣品性質(zhì)和分離要求，預(yù)設(shè)洗脫程序，包括流動(dòng)相比例、流速、梯度洗脫時(shí)間、檢測(cè)波長(zhǎng)等參數(shù)。?
 

　　二、具體操作步驟?

　　1、管路排氣：在控制系統(tǒng)中選擇 “排氣” 功能，啟動(dòng)輸液泵，讓流動(dòng)相依次流經(jīng)各管路和色譜柱，排除管路中的空氣。觀察管路中是否有氣泡，若有氣泡需反復(fù)排氣直至氣泡消除。對(duì)于多通道系統(tǒng)，需分別對(duì)每個(gè)通道進(jìn)行排氣操作，確保所有管路充滿流動(dòng)相。?

　　2、樣品上樣：將裝有樣品溶液的樣品瓶放入自動(dòng)進(jìn)樣器的樣品架中，在控制系統(tǒng)中設(shè)置進(jìn)樣體積、進(jìn)樣位置等參數(shù)。啟動(dòng)進(jìn)樣程序，自動(dòng)進(jìn)樣器會(huì)精準(zhǔn)吸取設(shè)定體積的樣品溶液，注入色譜柱頂端，完成上樣過程。上樣時(shí)需確保樣品全部進(jìn)入色譜柱，避免殘留或泄漏。?

　　3、啟動(dòng)洗脫與分離程序：確認(rèn)所有參數(shù)設(shè)置無誤后，在控制系統(tǒng)中啟動(dòng)洗脫程序。設(shè)備會(huì)按照預(yù)設(shè)的梯度方案自動(dòng)調(diào)節(jié)各流動(dòng)相的比例，控制輸液泵以設(shè)定流速將流動(dòng)相泵入色譜柱。同時(shí)，檢測(cè)器開始工作，實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)洗脫液的信號(hào)變化，并將數(shù)據(jù)傳輸至控制系統(tǒng)，在顯示屏上繪制色譜圖。?

　　4、自動(dòng)收集餾分：根據(jù)檢測(cè)器的信號(hào)或預(yù)設(shè)的時(shí)間區(qū)間，收集器會(huì)自動(dòng)切換收集瓶，對(duì)目標(biāo)組分進(jìn)行收集。操作人員需密切關(guān)注色譜圖的變化，判斷各峰的出峰時(shí)間和純度，必要時(shí)可手動(dòng)調(diào)整收集參數(shù)，確保目標(biāo)組分被完整收集，減少雜質(zhì)混入。?

　　5、程序結(jié)束與停機(jī)：當(dāng)所有組分洗脫完成后，設(shè)備會(huì)自動(dòng)執(zhí)行結(jié)束程序，停止輸液泵和檢測(cè)器工作。此時(shí)，在控制系統(tǒng)中選擇 “沖洗” 功能，用純?nèi)軇_洗色譜柱和管路，去除殘留樣品和雜質(zhì)，保護(hù)色譜柱性能。沖洗完成后，關(guān)閉輸液泵，將色譜柱從柱架上取下，妥善保存。?

　　三、操作后的清理與維護(hù)?

　　實(shí)驗(yàn)結(jié)束后，及時(shí)關(guān)閉過柱機(jī)的控制系統(tǒng)和總電源，將使用過的流動(dòng)相溶劑瓶清理干凈，剩余流動(dòng)相按規(guī)定處理，不可隨意傾倒。拆下各連接管路，用純水或合適溶劑沖洗干凈后晾干，放置在指定位置。?

　　對(duì)收集到的餾分進(jìn)行標(biāo)記和后續(xù)處理，如旋蒸濃縮、檢測(cè)純度等。清理收集器中的空瓶，清潔設(shè)備表面的污漬和液滴，保持設(shè)備整潔。同時(shí)，記錄實(shí)驗(yàn)過程中的關(guān)鍵參數(shù)和分離結(jié)果，包括樣品信息、色譜柱型號(hào)、流動(dòng)相組成、洗脫程序、色譜圖等，為后續(xù)實(shí)驗(yàn)提供參考。?

　　定期對(duì)自動(dòng)過柱機(jī)進(jìn)行維護(hù)保養(yǎng)，如清潔自動(dòng)進(jìn)樣器的進(jìn)樣針、檢查輸液泵的密封性、校準(zhǔn)檢測(cè)器的靈敏度等，確保設(shè)備長(zhǎng)期穩(wěn)定運(yùn)行，延長(zhǎng)使用壽命。